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春雨細(xì)如絲,花兒經(jīng)過春雨的沐浴,穿上了五彩斑斕的衣裙,簇?fù)碓谝黄穑銎鹆酥蓺獾哪槂海冻雒匀说男︻仯恍〔菰诖河甑淖虧?rùn)下,揚(yáng)起綠色的臉觀察著這奇妙的世界。公司為答謝新老客戶對(duì)我們長(zhǎng)期以來的支持,公司以顧客的需要為動(dòng)力,力求滿足顧客的全部需求,以飽滿的熱心效力每一位顧客,我司PCR試劑盒福利活動(dòng)優(yōu)惠樂翻天。快來搶購吧!
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活動(dòng)時(shí)間:2022年02月21日—2022年02月28日
注:本次活動(dòng)最終解釋權(quán)歸我司所有
本公司產(chǎn)品已經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè),并提供技術(shù)指導(dǎo),讓您的實(shí)驗(yàn)無后顧之憂!
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+。
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。